У нас уже 242733 рефератов, курсовых и дипломных работ
Заказать диплом, курсовую, диссертацию


Быстрый переход к готовым работам

Мнение посетителей:

Понравилось
Не понравилось





Книга жалоб
и предложений

 





Название ЗАВИСИМОСТЬ ПРОНИЦАЕМОСТИ МЕМБРАН КЛЕТОК СПЭВ ДЛЯ МОЛЕКУЛ ЭТИЛЕНГЛИКОЛЯ И 1,2-БУТАНДИОЛА ОТ ТЕМПЕРАТУРЫ
Количество страниц 56
ВУЗ Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина
Год сдачи 2008
Содержание МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ УКРАИНЫ
Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина
Радиофизический факультет

“К ЗАЩИТЕ”
Зав. кафедры
биологической и медицинской физики
доктор физ.-мат.наук, профессор
Ю.В.Малюкин
” ” 2008г.

ЗАВИСИМОСТЬ ПРОНИЦАЕМОСТИ МЕМБРАН КЛЕТОК СПЭВ ДЛЯ МОЛЕКУЛ ЭТИЛЕНГЛИКОЛЯ И 1,2-БУТАНДИОЛА ОТ ТЕМПЕРАТУРЫ


Научный руководитель,
кандидат биол. наук, ст.н.с.
___________И.Ф. Коваленко

Руководитель от кафедры,
доктор биол. наук, профессор
______________Л.Ф. Розанов

Студентка группы РБ-51
_________ Н.А. Чернобай



Харьков 2008
АННОТАЦИЯ
В работе с использованием метода волюмометрии определены коэффициенты проницаемости мембран клеток СПЭВ для молекул веществ ряда диолов - этиленгликоля (ЭГ) и 1,2-бутандиола (1,2-БД) при температурах 35, 18 и 7оС. Показано, что в диапазоне температур 35 – 7оС значения коэффициентов проницаемости для ЭГ изменяются от (4,151,31)10-7м/с до (0,72023)10-7м/с, а для 1,2-БД – от (6,641,1)10-7м/с до (0,770,17)10-7м/с. Рассчитанные в диапазоне температур 35 – 7 оС значения энергий активации проницаемости для молекул ЭГ и 1,2-БД составляют, соответственно, 45,07 и 55,35 кдж/моль. Различия в проницаемости ЭГ и 1,2-БД наиболее выражены при 35оС и отсутствуют при 7оС.

АНОТАЦІЯ
В роботі з використанням методу волюмометрії визначені коефіцієнти проникливості мембран клітин СПЕВ для молекул речовин ряду діолів – етиленгліколю (ЕГ) та 1,2-бутандіолу (1,2-БД) при температурах 35, 18 та 7 оС. Показано, що у діапазоні температур 35 – 7 оС значення коефіцієнтів проникливості для ЕГ змінюються від (4,151,31)10-7м/с до (0,72023)10-7м/с, а для 1,2-БД – от (6,641,1)10-7м/с до (0,770,17)10-7м/с. Визначені у діапазоні температур 35 – 7 оС значення енергій активації проникливості для молекул ЕГ та 1,2-БД складають, відповідно, 45,07 та 55,35 кдж/моль. Різниця в проникливості ЕГ та 1,2-БД найбільш виражена при температурі 35 оС і відсутня при 7 оС.

SUMMARY
In this work the permeability coefficients of SPEV cells membranes of such cryoprotective substances as EG and 1,2-BD were defined with volumometric method on differences temperatures such as 35, 18 and 7 оС. It was exhibited, that values of permeability coefficients for EG were changed from (4,151,31)10-7m/s to (0,72023)10-7m/s, and for 1,2-BD – from (6,641,1)10-7m/s to (0,770,17)10-7m/s. Values of activation energies permeability for EG and 1,2-BD molecules , calculated in temperatures interval from 35 to 7 оС, are 45,07 and 55,35 k J/ mole. Differences in permeability of EG and 1,2-BD are most express on 35 оС and miss on 7 оС.


































ОТЗЫВ

на магистерскую дипломную работу студентки V курса кафедры биологической и медицинской физики Харьковского национального университета им. В.Н.Каразина Чернобай Н.А. «Зависимость проницаемости мембран клеток СПЭВ для молекул этиленгликоля и 1,2-бутандиола от температуры».

Дипломная работа Чернобай Н.А. была выполнена в ИПКиК НАН Украины.
Работа посвящена актуальной проблеме изучения свойств таких криопротекторов как 1,2-БД и ЭГ, перспективных в плане криоконсервирования.
За время работы Чернобай Н.А. провела глубокий информационный поиск, освоила методы определения параметров проницаемости мембран клеток перевиваемой клеточной линии СПЭВ для молекул этиленгликоля и 1,2-бутандиола.
На основе анализа данных научной литературы Чернобай Н.А. в дипломной работе описала современное состояние изучаемой проблемы. В результате проведенных экспериментов было показано, что при температуре 35оС проницаемость мембран клеток СПЭВ для молекул 1,2-БД достоверно выше, чем для молекул ЭГ, а при 7оС достоверных различий в проницаемости этих диолов не выявлено. Определенные из температурных зависимостей проницаемости энергии активации для ЭГ и 1,2-БД составляют соответственно 45,07 и 55,35 кдж/моль.
За время работы Чернобай Н.А. проявила себя как инициативный, старательный работник, способный к анализу литературных данных и адекватной оценке собственных результатов.
Работа соответствует требованиям предъявляемым к дипломным работам и заслуживает оценки «отлично».










РЕЦЕНЗИЯ
на магистерскую дипломную работу студентки V курса кафедры биологической и медицинской физики Харьковского национального университета В.Н.Каразина Чернобай Н.А. «Зависимость проницаемости мембран клеток СПЭВ для молекул этиленгликоля и 1,2-бутандиола от температуры».


Работа посвящена актуальной проблеме изучения свойств веществ, перспективных в плане криоконсервирования. С использованием метода валюмометрии определены коэффициенты проницаемости мембран клеток перевиваемой клеточной линии СПЭВ для молекул воды и таких криопротекторов как 1,2-БД и ЭГ.
Чернобай Н.А. было изучено осмотическое поведение клеток СПЭВ в растворах 1М 1,2-БД и 1М ЭГ при температурах 35, 18 и 7 оС; определены параметры проницаемости плазматических мембран клеток СПЭВ для молекул воды и криопротекторов, на основе данных о кинетике изменения клеточного объёма, с использованием модифицированной физико-математической модели Кедем-Качальского; оценены энергии активации проницаемости молекул ЭГ и 1,2-БД через мембраны клеток СПЭВ в диапазоне температур 35 – 7 оС.
Было показано, что при температуре 35оС проницаемость мембран клеток СПЭВ для молекул 1,2-БД достоверно выше, чем для молекул ЭГ, а при 7оС достоверных различий в проницаемости этих диолов не выявлено. Определенные из температурных зависимостей проницаемости энергии активации для ЭГ и 1,2-БД составляют соответственно 45,07 и 55,35 кдж/моль.
Полученные данные дают информацию о характере проницаемости мембран клеток СПЭВ для молекул этиленгликоля и 1,2-бутандиола от температуры.
Работа выполнена на современном методическом уровне, соответствует требованиям предъявляемым к магистерским дипломным работам и заслуживает оценки «отлично».









СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ………………………………8
ВВЕДЕНИЕ ………………………………………………………………......……..9

Раздел 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ………………………………...…………….....12
1.1 Характеристика объекта исследования……………………………....12
1.1.1 Получение перевиваемых линий клеток почки эмбриона
свиньи (СПЭВ)……………………………………………………………….....…12
1.1.2 Практическое применение перевиваемых культур клеток………...13
1.2 Характеристика криопротекторов……………………………...................14
1.3 Консервирование перевиваемых клеточных культур ………………….16
1.4 Транспортные характеристики клетки…………………………………....19

Раздел 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ……………………23
2.1 Характеристика объекта исследования…………………………………...23
2.2 Микроскопия……………………………………………………….............23
2.3 Определение осмотически неактивного объёма клеток............................24
2.4 Определение параметров проницаемости плазматических мембран клеток СПЭВ при разных температурах................................................................25
2.5 Определение энергий активации проницаемости мембран для молекул диолов……………………………………………………………………………....28
2.6 Приготовление растворов............................................................................28
2.7 Статистическая обработка результатов......................................................28

Раздел 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ…………29
3.1 Осмотические реакции клеток СПЭВ и процессы массопереноса в растворах 1,2-БД и ЭГ.............................................................................................29
3.1.1 Осмотическая реакция клеток СПЭВ в гипертоническом растворе хлористого натрия…………………………………………………………………34
3.1.2 Осмотическая реакция клеток СПЭВ в гипертоническом растворе
1,2-БД при разных температурах............................................................................35
3.1.3 Осмотическая реакция клеток СПЭВ в гипертоническом растворе ЭГ при разных температурах..................................................................................37
3.2 Определение параметров мембранной проницаемости клеток СПЭВ....38
3.3 Механизмы проникновения диолов через мембраны клеток СПЭВ......41
3.4 Энергия активации процесса переноса молекул ЭГ и 1,2-БД через мембраны клеток СПЭВ в интервале температур………………………………43

ВЫВОДЫ..................................................................................................................46

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ..............................................47

ПРИЛОЖЕНИЯ…………………………………………………………………....50


Список литературы ВЫВОДЫ

1. С использованием метода волюмометрии и уравнений термодинамики необратимых процессов измерены коэффициенты проницаемости клеток СПЭВ для молекул ЭГ и 1,2БД при температурах 7, 18 и 35оС.

2. При температуре 35оС проницаемость мембран клеток СПЭВ для молекул 1,2БД достоверно выше, чем для молекул ЭГ, при 7оС достоверных различий в проницаемости этих диолов не выявлено.

3. Определенные из температурных зависимостей проницаемости энергии активации для ЭГ и 1,2БД составляют соответственно 45,07 и 55,35 кдж/моль.






СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Гордиенко Е.А., Пушкарь Н.С. Физические основы низкотемпературного консервирования клеточных суспензий. - К.: Наукова думка, 1994.- 142с.
2. Голубев Д.Б., Соломина А.А., Медведева М.Н. Руководство по применению клеточных культур в вирусологии. Л. Медицина, 1976г.
3. Сергеев В.А., Собко Ю.А. Культуры клеток в ветеринарии и биотехнологии - К.: Урожай, 1990-152с.
4. Захаров А.Ф. Поздняя редупликация хромосом в культивируемых клетках китайского хомячка // Цитология.-1966.-8.№2-с.201-207.
5. Культура клеток и тканей животных. Учебное пособие. Дьяконов Л.Л., Глухов В.Ф. и др., - Ставрополь, 1980-111с.
6. Методы культивирования клеток. Сб. научн. труд. Под ред. Пинаева Г.П., Л. Наука, 1988г.
7. Адамс Р. Методы культуры клеток для биохимиков. - М.: Мир, 1983, 263с.
8. Степанова Л.Г. Стабильность свойств перевиваемых клеток// Вирусные инфекции и противовирусные препараты. – М., 1961. – Т.2. – с.254-260.
9. Пушкарь Н.С., Белоус А.М. Введение в криобиологию // Консервирование кожи. - Киев: Наук. думка, 1975.-с.226-228.
10. Ермакова М.Н. Хранение клеток трипсинизированных почечных тканей животных при температуре 4-60С // Вирусные инфекции и противовирусные препараты. - М., 1961.- Т.2- с.225-231.
11. Кулешова К.С., Романова М.Е. Устойчивость перевиваемых линий клеток к действию низкой температуры // Вирусные инфекции и противовирусные препараты. - М., 1961.- Т.2- с.212-224.
12. Розанов Л.Ф., Гордиенко Е.А., Кулешова Л.Г. Неспецифические реакции клеток на физико-химические факторы криоконсервирования // Биохимические аспекты криоповреждения и криозащиты клеточных систем.- Харьков: Б.И., 1989.-с.48-52.
13. Karlsson J.O. M.Challenges in preservation of engincered tissue by freezing // Cryobiology. -1991. –Vol. 43(4). -P.349.
14. Холодный В.С. Изучение процессов, протекающих на различных этапах низкотемпературного консервирования в суспензиях ядросодержащих клеток костного мозга и кордовой крови: Дис…канд. биол. наук: 03.00.19.-Харьков.-2003.-148с.
15. Пишко О.В. Осмотическое поведение ооцитов и эмбрионов мыши на различных этапах криоконсервирования: Дис…канд. биол. наук: 03.0.19.-Харьков.-2004.-140с.
16. Некоз И.А., Гордиенко Е.А., Кулешова Л.Г., Розанов Л.Ф. Особенности гемолиза эритроцитов в водных растворах глицерина // Криоконсервирование клеток и тканей.- Харьков: Б.И.-1989.-с.54-61.
17. Attal M., Harousseau J.L., Stoppa A.M., et al. A prospective, randomized trial of autologus bone marrow transplantation and chemotherapy in multipieloma. Intergroupe Francais Du Myelome // N.Enge, J.Med. -1996. -Vol.335. -p.91-97.
18. Skorski T., Kawalec M. A simple method of bone marrow cryopreservation // Folia Histochem. Cytobiol. -1989.- Vol.279(2).- p.67-71.
19. Lovelok J.O., Bishop M.D. Prevention of freezing damage to living cells by dimethyl sulphoxide // Nature.- 1959.- Vol.183.-p.1394-1395.
20. Белоус Ф.М., Гордиенко Е.А., Розанов Л.Ф. Биохимия мембран: Замораживание и криопротекция.- К.: Наук. думка.- 1982.-255с.
21. Розанов Л.Ф. Кинетика реакций клеток на действие факторов криоконсервирования: Дис…д-ра биол. наук: 03.00.22.- Харьков.-1995.-242с.
22. Meryman H.T. Osmotik stress as a mechanism of freezing injury // Cryobiology.-1971.-9, №5.-p.489-501.
23. Криобиология и биотехнология / Под общ. ред. Цуцаевой А.А. – Киев: Наук. думка, 1987. – 216с.
24. Актуальные проблемы криобиологии / Под общ. ред. Пушкаря Н.С., Белоуса А.М. – Киев: Наук. думка, 1981.-с.344-371.
25. Розанов Л.Ф., Высеканцев И.П., Петренко Т.Ф., Коваленко И.Ф., Коший С.В. Чувствительность клеток перевиваемой клеточной линии СПЭВ и грибов Candida albicans к процессам вне- и внутриклеточной кристаллизации. Проблемы криобиологии, 2004, №3, с.18-25.
26. Безуглый Н.Д., Осташко Ф.И., Волкова Е.Г., Панцов В.М. Волюмометрия как метод изучения проницаемости мембранного аппарата яйцеклеток и эмбрионов млекопитающих // Научн.- техн. бюл. НИИ животновод.- Лесостепья и Полесья УССР. – 1986. - №43. – с.29-35.
27. Katchalsky A., Kedem O. Thermodynamics of slow process in biological system// Biophys.J.-1962.-Vol.2.-p.53-78.
28. Кравцов А.В., Алексенко И.Р. Механизмы регуляции векторных ферментов биомембран. – Киев: Наук. думка, 1990.-176с.
29. Гордієнко О.І., Лінник Т.П. Механізми проникання неелектролітів низки діолів крізь мембрани еритроцитів // Вісник ХНУ, 2002.-568.-Біофіз.вісник, вип.2.-С.43-47.
30. Characteristics of DMSP-lyase in Phaeocystis sp. (Prymnesiophyceae) / Stefels Jacqueline, Dijkhuizen Lubbert // Mar. Ecol. Progr. Ser. - 1996. - 131, No 1-3. - С. 307-313. - Англ.
31. Диллер К.Р. Измерение и моделирование осмотического поведения клеток при замораживании // Криобиология. – 1990. - №1. – с.11-17.
Стоимость доставки работы, в гривнах:

(при оплате в другой валюте, пересчет по курсу центрального банка на день оплаты)		 300





Найти готовую работу


ЗАКАЗАТЬ

Обратная связь:


Связаться

Доставка любой диссертации из России и Украины

Вход для партнеров

Регистрация

Восстановить доступ

Материал для курсовых и дипломных работ


Ссылки:

Выполнение и продажа диссертаций, бесплатный каталог статей и авторефератов

Счетчики:

Besucherzahler
счетчик посещений

© 2006-2022. Все права защищены.
Выполнение уникальных качественных работ - от эссе и реферата до диссертации. Заказ готовых, сдававшихся ранее работ.